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DNFB反应

DNFB在弱碱性溶液中发生亲核芳环取代反应而生成二硝基苯基氨基酸,简称DNP-氨基酸。

2,4二硝基氟苯简称DNFB或FDNB。

此反应首先被英国的Sanger用来鉴定多肽、蛋白质的N-末端氨基酸。

法一般应用于蛋白质一级结构的测定。

DNFB与蛋白质在室温,pH=8.0~9.0条件雄颈翻嫌下反应,生成DNP-蛋白;随之,在105℃,6mol/LHCl条件下水解,生成DNP-氨基酸及其它游离氨基酸。由于DNP-氨基酸溶于寒组棕兵乙醚,而其余氨基酸不溶,故用乙醚抽提出DNP-氨基酸,再将未知循挨驼样的DNP-氨基习归拔酸与碑犁戏已知料骗寒标准DNP-氨基酸在相同条件下进抹朽行纸层析,根据Rf值即可推断未知样N-末端为何种氨基酸。

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